Rôle de l'alarmine IL-33 dans un modèle murin d'ischémie- reperfusion hépatique - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2019

Role of the alarmin IL-33 in a mouse model of hepatic ischemia-reperfusion injury

Rôle de l'alarmine IL-33 dans un modèle murin d'ischémie- reperfusion hépatique

Résumé

Introduction: Interleukin (IL)-33 plays a role as an alarmin in the initiation of the inflammatory response in renal ischemia/reperfusion (I/R) injury, involving invariant natural killer T (iNKT) cells. Aims: The aim of this study was to establish whether IL-33 also acts as an alarmin in hepatic I/R injury and to explore the contribution of IL-33 and iNKT cells in the recruitment of neutrophil granulocytes and monocytes/macrophages after I/R. Methods: A model of warm hepatic ischemia with clamping of 70% of the liver was chosen in wildtype mice, IL-33 knock out (KO) mice and iNKT cell-deficient (Jα18 KO) mice with C57BL/6 background. Severity of I/R injury was assessed by plasma alanin-aminotransferase (ALT) measurement and histological analysis. Interleukin-33 was measured in blood and in liver by ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay ) and western blot while IL-33 neo synthesis was measured by RT-qPCR (reverse transcriptase- quantitative polymerase chain reaction). The recruitment of immune cells in liver after I/R was analyzed by flow cytometry. Results: In wild-type mice, IL-33 was constitutively expressed in liver endothelial cells of the sinusoids and of the portal venules, and was released from the ischemic phase and its immediate course into systemic circulation without neo-synthesis. I/R injury was decreased in IL-33-deficient mice after 4 hours of reperfusion, comparing to wild type mice. Therefore, in the first hours after ischemia, IL-33 acts as an alarmin and is at least partly responsible for I/R injury. I/R injury was also decreased in iNKT cell-deficient mice after 4 hours while in wild-type mice, iNKT cells were found activated in periphery (spleen) and recruited locally. Neutrophil granulocytes and monocytes/macrophages were recruited in the liver after one hour of reperfusion in wild type mice, whereas this recruitment was decreased in IL-33-deficient mice and in iNKT cell-deficient mice. These findings along with the fact that recruitment of iNKT cells was significantly decreased in IL-33 deficient mice, as compared to WT, lead to propose that an IL-33/iNKT cell axis mediates the early stages of inflammation in I/R liver injury. Conclusion: Interleukin-33, as an alarmin, early contributes to I/R liver injuries. It could act by recruiting iNKT cells that would in turn amplify the recruitment of immuno-inflammatory cells together with IL-33. Interleukin-33 hence represents a major potential therapeutic target to decrease I/R injury in liver transplantation.
Introduction : L’interleukine (IL)-33 joue un rôle d’alarmine dans l’initiation de la réponse inflammatoire aux lésions d’ischémie-reperfusion (I/R) rénale, impliquant les lymphocytes T “invariant natural killer” (iNKT). Objectifs : Déterminer si l’IL-33 agit également comme une alarmine en I/R hépatique et évaluer la contribution de l’IL-33 et des cellules iNKT dans le recrutement des polynucléaires neutrophiles et des monocytes/macrophages après I/R. Méthodes : Nous avons choisi un modèle d’ischémie chaude hépatique par clampage à 70% du foie de Souris C57BL/6 sauvages, déficientes en IL-33 (IL-33 KO) ou déficientes en cellules iNKT (Jα18 KO). La sévérité des lésions d’I/R a été évaluée par dosage plasmatique des Alanine amino transférases (ALAT) et analyse histologique des lobes de foie clampés. L’IL-33 a été déterminée dans le sang et le foie, respectivement par ELISA (pour « enzyme-linked immunosorbent assay ») et western blot et sa néo-synthèse par RT-PCRq (pour « reverse transcriptase-polymerase chain reaction quantitative »). Le recrutement des cellules immuno-inflammatoires dans le foie après I/R a été analysé par cytométrie en flux. Résultats : Chez les Souris sauvages, l’IL-33 était constitutivement exprimée dans les cellules endothéliales des sinusoïdes et des veinules portes du foie et était immédiatement libérée pendant la phase d’ischémie dans la circulation sanguine sans néo-synthèse. Quatre heures après la reperfusion, les lésions d’I/R étaient diminuées chez les souris déficientes en IL-33, comparativement aux souris sauvages. Ainsi, dès les premières heures après l’ischémie, l’IL-33 agit comme une alarmine et est en partie responsable des lésions d’I/R. Les lésions d’I/R étaient également diminuées chez les souris déficientes en cellules iNKT, tandis que chez les Souris sauvages, les cellules iNKT étaient activées en périphérie (dans la rate) et recrutées localement. Les polynucléaires neutrophiles et les monocytes/macrophages étaient recrutés dans le foie après une heure de reperfusion chez les Souris sauvages, alors que ce recrutement était significativement réduit chez les souris déficientes en IL-33 et chez les souris déficientes en iNKT, suggérant qu’à la fois l’IL-33 et les cellules iNKT contribuent au recrutement de cellules immuno-inflammatoires. Enfin, le recrutement des cellules iNKT était significativement diminué chez les souris déficientes en IL-33 comparativement aux souris sauvages. Cet ensemble de résultat est conciliable avec l’existence d’un axe IL-33/iNKT intervenant dans les phases précoces de l’inflammation lors de l’I/R hépatique. Conclusion : L’IL-33, en tant qu’alarmine, contribue précocement aux lésions d’I/R hépatique. Elle pourrait agir en mobilisant les cellules iNKT, lesquelles avec l’IL-33, amplifieraient le recrutement des cellules immuno-inflammatoires. L’IL-33 constitue donc une nouvelle cible thérapeutique potentielle pour réduire les lésions d’I/R en transplantation hépatique.
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Identifiants

  • HAL Id : tel-02471751 , version 1

Citer

Louise Barbier. Rôle de l'alarmine IL-33 dans un modèle murin d'ischémie- reperfusion hépatique. Organisation et fonctions cellulaires [q-bio.SC]. Université de Poitiers - Faculté des Sciences Fondamentales et Appliquées, 2019. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-02471751v1⟩
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