Molecular characterization of the role of FOXL2 and its partners in the healthy and pathological ovary
Caractérisation moléculaire du rôle de FOXL2 et de ses partenaires dans l’ovaire sain et pathologique
Résumé
FOXL2 is a major transcription factor in ovarian granulosa cells, involved in their differentiation, maintenance andfunction. A specific mutation (p.C134W) is found in the majority of adult forms of granulosa cell tumors. Therefore FOXL2has been described to play a role both in the healthy or pathological ovary. In order to understand its molecular action,we have identified its direct and indirect transcriptomic targets as well as its binding sites on the genome using high-throughput approaches.We have identified more than 1000 target genes and new putative roles for FOXL2. In addition, AKT is proposed to inhibit,probably indirectly, the activity of FOXL2 on genes mainly involved in cell migration.FOXL2 has many partners including ESR2, SMAD3 and TRIM28, which are thought to co-regulated FOXL2 targets ingranulosa cells. We performed an analysis of the targets of these partners and of the binding of FOXL2 in their presenceor absence. For ESR2, in particular, we identified more than 350 targets involved in development, in the regulation of cellmigration and the organization of the extracellular matrix. We have shown that the presence of ESR2 is required forFOXL2 binding to chromatin and that they co-regulate the expression of more than 150 genes. Moreover, their joint actioncontrols the expression of Phactr1 modulating cell migration, invasion and adhesion.In a second project, still in progress, I wish to characterize the targets of FOXL2 p.C134W, at the transcriptomic level. Cellscarrying the mutation at the hemizygous state as well as WT control lines for FOXL2 were obtained by CRISPR/Cas9 andanalyzed by RNAseq. The results obtained are promising and will help understand the role of FOXL2 in these tumors.
FOXL2 est un facteur de transcription majeur des cellules de la granulosa, participant à leur différenciation, leur maintienet leurs fonctions. Une mutation spécifique (p.C134W) est retrouvée dans la majorité des formes adultes des tumeurs descellules de la granulosa. FOXL2 joue donc un rôle à la fois dans l’ovaire sain mais aussi dans l’ovaire pathologique. Pourcomprendre son action moléculaire nous avons identifié par des analyses haut-débit ses cibles transcriptomiques directeset indirectes ainsi que ses sites de fixation sur le génome.Nous avons identifié 1001 gènes cibles et de nouveaux rôles putatifs pour FOXL2. De plus, AKT inhiberait, probablementde façon indirecte, l’activité de FOXL2 sur des gènes impliqués principalement dans la migration cellulaire.FOXL2 possède de nombreux partenaires parmi lesquels ESR2, SMAD3 et TRIM28, semblent jouer un rôle dans ledéveloppement et le maintien des cellules de la granulosa. Nous avons réalisé une analyse des cibles transcriptomiquesde ces partenaires et de la fixation de FOXL2, en leurs présences et en leurs absences. Pour ESR2, particulièrement, nousavons identifié de nouvelles cibles impliquées dans le développement, la régulation de la migration cellulaire etl’organisation de la matrice extracellulaire. Nous avons montré que la présence d’ESR2 est nécessaire à une bonne fixationde FOXL2 sur la chromatine et qu’ensemble ils régulent l’expression de plus de 150 gènes. De plus, leur action conjointepermet l’expression de Phactr1 assurant une migration, une invasion et une adhésion cellulaire correctes.Dans un second projet, toujours en cours, nous souhaitons caractériser les cibles de FOXL2 p.C134W, au niveautranscriptomique. Des cellules, portant la mutation à l’état hémizygote ainsi que des lignées contrôles WT pour FOXL2,ont été obtenues par CRISPR/Cas9 et analysées par RNAseq. Les résultats obtenus sont prometteurs et permettront decomprendre le rôle de FOXL2 dans ces tumeurs.
Origine : Version validée par le jury (STAR)