Hydrogen/deuterium exchange coupled to mass spectrometry in structural proteomics

Apports de l'échange hydrogène/deutérium couplé à la spectrométrie de masse en protéomique structurale pour la caractérisation de complexes multi-protéiques.

Guillaume Terral (1)

1 IPHC - Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien

This thesis work focuses on development of structural mass spectrometry methods for the analysis of recombinant proteins and their associated complex. The central objective has focused on the development of hydrogen/deuterium exchange coupled to mass spectrometry approaches (HDX-MS). The high resolution biophysical techniques for structural characterization such as crystallography or NMR regularly face problems of crystal productions, size analyzable complex or quantity of material required. The development of specific HDX-MS methods allowed the characterization of various, and refractory protein systems to high resolution approaches. The combination of this approach with complementary structural MS tools is also illustrated, and shows its interest to obtain increased resolution information.

Ce travail de thèse porte sur développement de méthodes en spectrométrie de masse structurale pour l’analyse de protéines recombinantes et de leurs complexes associés. L’objectif central s’est porté sur des développements méthodologiques en échange hydrogène/deutérium couplé à la spectrométrie de masse (HDX-MS). Les techniques biophysiques de caractérisation structurale à haute résolution comme la cristallographie ou la RMN se heurtent régulièrement à des problèmes de productions de cristaux, de taille de complexes analysables ou encore de quantité de matériel nécessaire importante. Le développement de méthodes spécifiques HDX-MS a permis de réaliser une caractérisation structurale de systèmes protéiques variés, et réfractaires aux approches haute résolution. La combinaison de cette approche à différents outils de MS structurale est aussi illustrée, et montre tout son intérêt pour l’obtention d’informations à résolution augmentée.

Mots clés: Structural mass spectrometry; Hydrogen/deuterium exchange; Native mass spectrometry; Proteins; Therapeutic antibodies; Ribonucleoproteins

Mots clés: Spectrométrie de masse structurale; Échange hydrogène/deutérium; Spectrométrie de masse native; Protéines; Anticorps thérapeutiques; Ribonucléoprotéines

Domaines: Chimie analytique

Guillaume Terral. Apports de l'échange hydrogène/deutérium couplé à la spectrométrie de masse en protéomique structurale pour la caractérisation de complexes multi-protéiques.. Chimie analytique. Université de Strasbourg, 2016. Français. ⟨NNT : 2016STRAF019⟩. ⟨tel-01558762⟩