Skip to Main content Skip to Navigation
Theses

Etude structurale et fonctionnelle par RMN d'une chaperonine de 1 MDa en action

Résumé : Les chaperonines sont des chaperonnes moléculaires indispensables pour le repliement de certaines protéines dans les cellules. La taille et la complexité de ces machineries biologiques rendent complexes l'étude de leurs propriétés structurales et fonctionnelles. La spectroscopie RMN permet de suivre des changements structuraux et dynamiques en temps réel avec une résolution atomique. Cependant, l'étude par RMN de protéines ou de complexes de haut poids moléculaires a été un challenge pendant de nombreuses années. Dans la première partie de cette thèse, il a été montré que la combinaison de marquage spécifique des groupements méthyles, d'expériences RMN optimisées et de microscopie électronique peut être utilisée pour suivre différents états du cycle fonctionnel d'une chaperonine de 1 MDa. Pour étudier ce mécanisme, la chaperonine native a été reconstituée avec un marquage des groupements méthyles des méthionines et valines. Les résidus méthionines ont pu être utilisés comme des sondes pour identifier les spectres RMN correspondant aux états intermédiaires et aux espèces actives du cycle fonctionnel. Grâce à ces sondes il a été possible de suivre en temps réel les réarrangements structuraux correspondant aux différentes conformations de la chaperonine durant son cycle fonctionnel. La seconde partie traite de la caractérisation de l'interaction de la chaperonine avec une protéine cliente dépliée. L'observation de la stabilisation de l'état déplié de la protéine par la chaperonine a permis de mettre en évidence une activité de "holdase" de la chaperonine. En utilisant une combinaison astucieuse de différents marquages de groupements méthyles et d'expériences RMN optimisés pour des assemblages de haut poids moléculaire, il a été possible d'observer le repliement de cette protéine par la chaperonine et les effets de la présence d'une protéine dépliée sur le cycle fonctionnel de la chaperonine en action.
Complete list of metadatas

https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01484643
Contributor : Abes Star :  Contact
Submitted on : Tuesday, March 7, 2017 - 3:09:11 PM
Last modification on : Wednesday, July 15, 2020 - 1:02:03 PM
Document(s) archivé(s) le : Thursday, June 8, 2017 - 2:09:14 PM

File

MAS_2015_archivage.pdf
Version validated by the jury (STAR)

Identifiers

  • HAL Id : tel-01484643, version 1

Collections

Citation

Guillaume Mas. Etude structurale et fonctionnelle par RMN d'une chaperonine de 1 MDa en action. Biochimie [q-bio.BM]. Université Grenoble Alpes, 2015. Français. ⟨NNT : 2015GREAV036⟩. ⟨tel-01484643⟩

Share

Metrics

Record views

308

Files downloads

151