, 05 mmol, 0,27 mmol/g) Une solution TFA
, 93% CZE citrate (15 min, 15 kV) : 98%, acétate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 73 H 115
, 92% CZE citrate (15 min, 15 kV) : 98%, acétate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 73 H 115
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 92% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 94% CZE citrate (15 min, 15 kV) : >99%, acétate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 83 H 118
, 99% CZE citrate (15 min, 15 kV) : 97%, acétate (10 min, 10 kV) : 97% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 83 H 118
, Une solution TFA été mise en contact avec la peptidyl-résine pendant 2h. Le peptide a été précipité par d'un mélange froid d'Et 2 O/n-heptane (100 mL, p.centrifugé
, > 99% CZE citrate (15 min, 15 kV) : 98% ; acétate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 76 H 132
, 15 kV) : 98% ; acétate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 82 H 144, 1921.
, éq, 22 mg) a été dissoute dans une solution de nBu 4 N + OH -(1 éq, p.172
, Cl 2 a été rajouté pour obtenir une concentration finale en taurine de 10 mM Ce mélange a été ajouté sur le BPNPC (1 éq, 52 mg) Après 1h d'agitation à température ambiante, la formation de 74 a été contrôlée par CCM (CH 2 Cl 2 /MeOH Le solvant a été évaporé à sec et le produit a été purifié par RP-HPLC (0-10% de B en 10 min
, > 99% CZE borate (10 min, 15 kV) : > 99% ; phosphate (10 min, 10 kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 97 H 156
, Biot)-OH La peptidyl-résine a été lavée avec le NMP (5 × 2 min), La Fmoc-K-(Biot)-OH, vol.1, issue.5
, 95 éq) ont été solubilisés dans le NMP. La DIEA (3 éq) a été ajoutée sur le TBTU et le tout a été additionné sur la Fmoc-K-(Biot)-OH. Après une minute d'agitation, ce mélange a été ajouté sur la peptidyl-résine placée dans un réacteur équipé d'un fritté. Après 2h d'agitation, la peptidyl-résine a été lavée avec le NMP (5 × 2 min) Un test TNBS a montré l
, mmol/g) La peptidyl-résine a été traitée avec une solution de pipéridine à
, été mise en contact avec la peptidyl-résine pendant 2h. Le peptide a été précipité dans un mélange froid d'Et 2 O/n-heptane (20 mL, 4°C), p.centrifugé
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 82% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 92% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 87% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, été mise en contact avec la résine pendant 2h. Le peptide a été précipité dans un mélange froid t-butylméthyl éther/n-heptane (5 mL, centrifugé 4°C), et lavé (2 fois)
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 83% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 91% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : 90% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour
, 10 mM) a été réalisée dans un tampon phosphate de sodium (0,2 M, pH = 7,5) contenant 10 mM en TCEP. Après 32h d'agitation, le peptide a été purifié à l'aide d'une colonne Sep-Pak ® C18. La colonne a été conditionnée avec le tampon B (3 × 1 mL) puis avec le tampon A (5 × 1 mL) Le milieu réactionnel a été déposé sur la colonne Sep
, 60 mg), Purification : 0-10% de B en 5 min, 10-30% de B en 60 min
, 0-100% de B en 30 min, 30°C, C18 Nucléosil) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 104 H 160, p.2731
, kV) : 63% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 73 H 115
, kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 73 H 115
, kV) : 97% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 68 H 114, M+H] + = 1503.8, observée 1503
, 97% CZE phosphate (10 min, 20 kV) : 98,7% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 83 H 118
, kV) : > 99% MALDI-TOF masse monoisotopique calculée pour C 83 H 118, 30°C, C18 Nucléosil) : > 99% CZE phosphate