ETUDE DES INTERACTIONS ENTRE PROTEINES ET LESIONS DE L'ADN PAR RESONANCE PLASMONIQUE DE SURFACE PAR IMAGERIE (SPRI)

Christelle Corne 1
1 LAN - Laboratoire Lésions des Acides Nucléiques
SYMMES - SYstèmes Moléculaires et nanoMatériaux pour l’Energie et la Santé, INAC - Institut Nanosciences et Cryogénie
Résumé : L'ADN étant le support de l'information génétique, les lésions de l'ADN provoquées par différents stress physiques ou chimiques sont un défi pour les systèmes de réparation cellulaire. Parmi ceux-ci le système de réparation par excision de bases (BER) implique plusieurs enzymes dont les objectifs sont la reconnaissance et le retrait de la base lésée, fonctions bien connues pour deux glycosylases : Fpg Procaryote et OGG1 Eucaryote. De nombreuses approches ont été décrites pour étudier les interactions ADN/protéine in vitro. Avec la résonance plasmonique de surface par imagerie (SPRi), nous disposons d'une technique d'analyse en temps réel, sans marquage avec laquelle nous avons pu observer des interactions parallélisées d'une même protéine enzymatique purifiée (Fpg, OGG1, EndoIV ou Ape1) vis-à-vis de différentes lésions sur des oligonucléotides de synthèse immobilisés sur une surface d'or. Les dommages étudiés sont une base oxydée (8-oxoG), une base cyclisée (cycloadénine) et des analogues de sites abasiques (THF et C3). Nous avons également étudié l'action de ces mêmes enzymes sur des lésions multiples, en tandem, associant les bases 8-oxoG et 8-oxoA sur le même brin d'ADN. L'originalité de notre dispositif associe l'analyse directe de l'interaction ADN/protéine et l'approche indirecte de sa conséquence par une stratégie d'hybridation et d'amplification du signal après une rampe thermique. Les résultats obtenus permettent d'envisager l'utilisation de notre technique pour observer la réparation simultanée de certaines lésions par des extraits cellulaires pour des travaux de biochimie ou des extraits tissulaires humains pour des travaux de biologie médicale.
Type de document :
Thèse
Autre. Université Joseph-Fourier - Grenoble I, 2010. Français
Domaine :


https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00505298
Contributeur : Christelle Corne <>
Soumis le : vendredi 23 juillet 2010 - 11:37:33
Dernière modification le : vendredi 3 juin 2016 - 01:04:31
Document(s) archivé(s) le : lundi 25 octobre 2010 - 12:13:30

Identifiants

  • HAL Id : tel-00505298, version 1

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Citation

Christelle Corne. ETUDE DES INTERACTIONS ENTRE PROTEINES ET LESIONS DE L'ADN PAR RESONANCE PLASMONIQUE DE SURFACE PAR IMAGERIE (SPRI). Autre. Université Joseph-Fourier - Grenoble I, 2010. Français. <tel-00505298>

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