Functional and molecular interactions of caveolin-3 with the L-type voltage-gated calcium channel in skeletal muscle cells
Interactions fonctionnelles et moléculaires de la cavéoline-3 et du canal calcique de type L dans les cellules musculaires squelettiques
Résumé
Caveolin (Cav) is a scaffolding protein found in caveolae. It has been suggested that Cav-3, the major striated muscle isoform, is involved in skeletal muscle calcium homeostasis. Our goal was to characterize the interactions of Cav-3 with the L-type voltage-gated calcium channel. We first investigated the consequences of Cav-3 deficiency consecutive to the expression of the myopathy-associated mutant Cav-3P104L. Our results indicate that Cav-3 P104L expression i) specifically reduces the maximal conductance of the L-type calcium channel in mouse primary cultured skeletal myotubes as well as in foetal and adult skeletal fibers, and ii) leads to a significant reduction of the L-type calcium channel membrane expression. Moreover, we showed that both Cav-3 and the L-type calcium channel colocalize at the surface membrane and in muscle extracts. Finally, in vitro binding experiments strongly suggested a direct molecular interaction between Cav-3 and the L-type calcium channel.
La cavéoline (Cav) est une protéine dite « de scaffolding » présente dans les cavéoles. La Cav-3, isoforme majeure du muscle strié, aurait un rôle dans l'homéostasie calcique du muscle squelettique. Notre but était de caractériser les interactions entre la Cav-3 et le canal calcique voltage-dépendant de type L. Nous avons tout d'abord étudié les conséquences d'une déficience en Cav-3 suite à l'expression du mutant pathologique Cav-3P104L. Nos résultats indiquent que l'expression de Cav-3P104L i) réduit spécifiquement la conductance des canaux de type L dans des myotubes squelettiques primaires, des fibres fœtales en survie et adultes, ii) entraîne une réduction significative de l'expression membranaire du canal de type L. De plus, nous avons montré que la Cav-3 et le canal de type L sont colocalisés à la membrane plasmique et dans des extraits musculaires. Enfin, des expériences d'interaction in vitro suggèrent une interaction moléculaire directe entre ces deux protéines.
Loading...