438 articles  [english version]
Fiche détaillée Thèses
Université d'Angers (20/11/2009), Catherine Passirani (Dir.)
Liste des fichiers attachés à ce document : 
PDF
These_Morille.pdf(7.8 MB)
Thérapie génique à l'aide de nanocapsules lipidiques PEGylées
Marie Morille1

A ce jour, l'objectif principal de la thérapie génique par voie intraveineuse est le développement de vecteurs pouvant encapsuler et délivrer des acides nucléiques au niveau de cellules cibles, avec l'efficacité de transfection des vecteurs viraux. Dans ce but, des nanocapsules lipidiques chargées en lipoplexes de DOTAP/DOPE, les LNC ADN, ont été utilisées. Ainsi, ces vecteurs ont été post-insérés avec de longues chaînes de poly (éthylène glycol) (PEG), grâce à l'utilisation de deux types de polymères amphiphiles : le DSPE-mPEG2000 et le copolymère F108. Une étude physico-chimique de la modification de surface a été réalisée. La présence de chaînes de DSPE-mPEG2000 en configuration brosse, a permis l'obtention d'un vecteur furtif aux yeux du système immunitaire capable de s'accumuler de manière significative au niveau des tissus tumoraux, grâce à un effet EPR. En parallèle, un modèle de ciblage extracellulaire du récepteur aux asialoglycoprotéines des hépatocytes a été envisagé. Le greffage de résidus galactose à l'extrémité des chaînes de PEG du copolymère F108, a permis l'expression spécifique d'un transgène au niveau des hépatocytes primaires de rat.
1 :  Ingénierie de la vectorisation particulaire
transfection – vecteur non-viral – voie systémique – poly (éthylène glycol) – effet EPR – tumeur – galactose – hépatocytes

PEGylated lipid nanocapsules for gene therapy
The main objective of gene therapy via a systemic pathway is the development of a stable and non-toxic gene vector that can encapsulate and deliver foreign genetic materials into specific cell types with the transfection efficiency of viral vectors. In this way, lipid nanocapsules loaded with DOTAP/DOPE lipoplexes, named DNA LNCs were used. These vectors were post-inserted by with long poly (ethylene glycol) (PEG) chains, thanks to two kinds of amphiphilic polymers: DSPEmPEG2000 and copolymer F108. A physico-chemical study of the surface modification was realized. The association of DSPE-mPEG2000 chains in a brush conformation allowed to obtain a stealth vector able to accumulate significantly in tumor tissues by EPR effect. In parallel, a model of extracellular targeting of asialoglycoprotein receptors over-expressed on hepatocytes was envisaged. The grafting of galactose residues at the extremity of F108 PEG chains allowed the specific expression of a transgene in rat primary hepatocytes.
transfection – non-viral vector – systemic pathway – poly (ethylene glycol) – EPR effect – tumor – galactose – hepatocytes