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Fiche détaillée Thèses
Université Joseph-Fourier - Grenoble I (27/04/2006), Marie-Bernadette Villiers (Dir.)
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Des puces à protéines/peptides pour des applications en recherche fondamentale et clinique
Boutheina Cherif1

Les biopuces sont des systèmes miniaturisés qui permettent des analyses en parallèle et à haut débit. Ainsi, les puces à protéines/peptides sont très utiles dans l'étude des interactions entre diverses molécules biologiques. Nous avons réalisé des puces à protéines et peptides en se basant sur la technologie des polymères conducteurs : la méthode consiste à immobiliser les molécules sondes (protéines ou peptides) sur des supports par électrocopolymérisation à partir d'un mélange de pyrrole et de pyrrole lié à la molécule sonde. Le support consiste en un prisme recouvert d'un film d'or permettant l'analyse des interactions protéine-protéine ou antigène-anticorps par imagerie de la résonance plasmonique de surface. Cette méthode optique, compatible avec des mesures en parallèle, permet une analyse directe, en temps réel et donne accès aux paramètres cinétiques des interactions. Ces puces, de réalisation facile, présentent une très bonne spécificité et une bonne sensibilité. Elles peuvent être régénérées un grand nombre de fois et sont compatibles avec l'analyse d'échantillons biologiques complexes tels que du sérum non dilué. Ces caractéristiques permettent un champ d'application très large, en recherche fondamentale ou clinique mais aussi en diagnostic.
1 :  Contrôle moléculaire de la réponse immune specifique
puce à protéines – puce à peptides – électropolymérisation – polypyrrole – imagerie SPR – VHC – antigène – anticorps

Proteins/peptides microarray for fondamental and clinical research applications
Microarrays are promising devices for high throughput analysis, especially, proteins/peptides chip which is a useful tool for biomedical interactions studies. The chip was designed by electrocopolymerisation of pyrrole and pyrrole-modified biomolecules on gold surfaces. The chip was used to analyse protein-protein or antigen-antibody interactions by surface plasmon resonance imaging which is a direct, real time method suitable for parallel analysis. This method allows dynamic studies to follow the association and the dissociation rates from kinetic curves. This work shows the efficiency of such microarray with high specificity, good sensitivity and possibility of regeneration. Moreover, we demonstrated its compatibility with the analysis of complex biological samples such as undiluted serum. Taken together, these characteristics make this method a powerful tool for numerous applications, including fundamental or clinical researches as well as diagnosis.
protein chip – peptides chip – electropolymerisation – polypyrrole – SPR imaging – HCV – antigen – anticorps