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Université Pierre et Marie Curie - Paris VI (27/09/2004), Angelova Miglena (Dir.)
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DYNAMIQUE DES MEMBRANES HETEROGENES ET EFFETS DES MOLECULES D'ASYMETRIE STERIQUE POSITIVE. ETUDES SUR DES VESICULES GEANTES
GALYA STANEVA1

Les systèmes modèles (vésicules géantes unilamellaires) représentent un outil indispensable pour étudier la formation, la stabilité, la dynamique et les fonctions des rafts dans les membranes biologiques. L'originalité de notre étude réside : i) dans la visualisation du bourgeonnement et de la fission induits par des agents biologiques (sPLA2 ou Lyso PC) et ii) dans la visualisation directe de la solubilisation d'une membrane modèle de type Ld/Lo ainsi que le bourgeonnement et la fission des domaines Lo traitée avec des détergents (Triton X-100, Brij 98). Ces expériences appuient l'idée que l'isolement de DRM à partir des membranes cellulaires n'est probablement pas un artefact. Nous avons décrit un mécanisme possible pour l'expulsion d'une vésicule en phase Lo déclenché par des molécules d'asymétrie stérique positive. Enfin, les VGU hétérogènes peuvent présenter un modèle assez proche des phénomènes observés sur les membranes biologiques.
1:  Trafic Membranaire et Signalisation Dans les Cellules Epitheliales
VGU (vesicules geantes unilamellaires) – radeaux lipidiques – phase liquide ordonnee – PLA2 – Detergents – Bourgeonnement – Fission

Dynamics of heterogeneous membranes and effects of the molecules having positive steric asymmetry. Study on giant vesicles
The model systems (giant unilamellar vesicles, GUVs) represent an essential tool to study the formation, stability, dynamics and the functions of rafts in biological membranes. We developed a methodology for studding domain budding and fission from a heterogeneous GUV. That made it possible: i) to visualize vesicle budding and fission events induced by biological agents (sPLA2, Lyso PC), and, ii) to directly visualize the effects of detergents (Triton X100, Brij 98) on GUVs - the selective solubilization of the Ld/Lo membrane and the budding and fission of Lo domains. These experiments support the idea that DRM extraction from cell membranes was not an artefact. We suggested as well a possible mechanism for the Lo domain vesicle fission induced by molecules having positive steric asymmetry. Finally, our results show that giant heterogeneous vesicles present an essential progress in the development of model membrane systems mimicking biological membrane structure and functions.
GUV (giant unilamellar vesicles) – rafts – liquid ordered phase – DRM – PLA2 – Detergents – Budding – Fission