Influence of melanocytes in the ex-vivo reconstructed epidermal melanin unit following an acute UV irradiation
Rôle des mélanocytes dans l'unité épidermique de mélanisation reconstruite ex-vivo après une irradiation UV aiguë
Résumé
Influence of melanocytes in skin pigmentation is well documented, however its photoprotective role is controvert. Role of melanocytes have been investigated on reconstructed epidermis with 100 % of keratinocytes or 95 % of keratinocytes and 5 % of melanocytes. In a first time, effect of an acute UVB dose has been studied on both reconstructs, next we have investigated UVA and UVA+B effects on these epidermis. Following irradiation, presence of melanocytes in reconstructed epidermis protects against apoptosis without protects significantly against DNA damage formation (CPD, 6-4PP) and protects against UV-induced unbalance of the SOD/catalase ratio (antioxidants enzymes). On the contrary, presence of melanocytes in reconstructed epidermis amplifies lipids and proteins oxidations but seems to protect against DNA oxidations. Melanocytes differ from keratinocytes by their melanin content and their more important concentration in polyunsaturated fatty acids. To evaluate what is the part of melanin and the part of polyunsaturated fatty acids in epidermal UV responses, reconstructed epidermis with keratinocytes have been supplemented with polyunsaturated fatty acid. This study indicates that polyunsaturated fatty acids are responsible for lipids and proteins oxidations and that melanin protect against DNA oxidation induced by lipoperoxidation. All these studies demonstrate that, model of reconstructed epidermis and epidermis in-vivo have the same behaviour following UV irradiation. In a last time, sunscreens and antioxidants have been tested on reconstructed epidermis and have demonstrated that model of reconstructed epidermis is suitable for photoprotective molecules screening.
Le rôle du mélanocyte dans la pigmentation de la peau n'est plus a démontré, par contre son rôle photoprotectif est controversé. Le rôle du mélanocyte a été étudié en comparant des épidermes reconstruits avec 100 % de kératinocytes et des épidermes reconstruits avec 95 % de kératinocytes et 5 % de mélanocytes. Dans un premier temps, l'effet d'une irradiation UVB aiguë a été étudié sur ces deux types de reconstructions, puis l'étude a été élargie aux effets des UVA et des UVA+B. Ces études ont permis de montrer, qu'après irradiation, la présence de mélanocytes au sein de l'épiderme reconstruit prévient l'apoptose sans pour autant protéger de façon significative de la formation des lésions directes de l'ADN (CPD et 6-4PP) et permet le maintien du rapport SOD/Catalase (principales enzymes antioxydantes). Par contre, la présence de mélanocytes au sein de l'épiderme amplifie les oxydations lipidiques et protéiques UV-induites mais semble prévenir l'oxydation de l'ADN. Les mélanocytes possèdent en plus de la mélanine, une plus grande concentration en acides gras polyinsaturés membranaires que les kératinocytes. Afin d'estimer quelle est la part de la mélanine et quelle est celle des acides gras polyinsaturés mélanocytaires dans les réponses UV-induites, des épidermes reconstruits avec des kératinocytes ont été suppléméntés avec des acides gras polyinsaturés. Cette étude a permis de mettre en évidence que ce sont les acides gras qui induisent l'amplification des oxydations lipidiques et protéiques alors que la mélanine protège l'ADN de l'oxydation induite par la lipoperoxydation. Ces différentes études ont également permis de montrer que face aux UV, l'épiderme reconstruit se comporte de façon similaire à l'épiderme normal in-vivo. Dans un dernier temps, des crèmes solaires et des antioxydants systémiques ont été testés et ont permis de confirmer que le modèle d'épiderme reconstruit est tout à fait adapté au test de molécules photoprotectrices.